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恒遠小貼士:一抗的選擇要點和技巧是什么?
更新時間:2016-07-19 點擊次數(shù):1857

(1)單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像dao彈地 命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應 中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可 以通過封閉等避免)。

(2)應用范圍的選擇。有的一抗只能用于Western blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至表明石蠟切片或冰凍切片。

(3)種屬反應性的選擇。這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內(nèi)的抗原。

(4)種屬來源,一般兔來源的多是多克隆;而小鼠來源的多是單克隆,但也有另外。根據(jù)此來源來選擇相應的二抗。

(5)生產(chǎn)廠家的選擇。不同廠家的同一種抗體它的實際效價,穩(wěn)定是不同的。

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